PCR实验室设计、装修、建设整体服务方案

PCR是聚合酶链式反应的简称。

是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统，能迅速掌握患者体内的病毒含量，其精确度高达纳米级别，精确检测乙肝病毒在患者体内存在的数量、是否复制、是否传染、传染性有多强、是否必要服药、肝功能有否异常改变能及时判断病人最适合使用哪类抗病毒药物、判断药物疗效如何、给临床治疗提供了可靠的检验依据。

临床基因扩增检验实验室又称分子实验室、PCR实验室。已逐渐成为检验领域必不可少的一部分，原则上临床基因扩增检验实验室应当设置以下区域：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。

这4个区域在物理空间上必须是完全相互独立的，各区域无论是在空间上还是在使用中，应当始终处于完全的分隔状态，不能有空气的直接相通。

二、PCR实验室平面设计布局

PCR扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域：试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。为避免交叉污染，进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。 各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。

临床PCR实验室设计的“16字口诀”：各区独立、注意风向、因地制宜、方便工作。

(1)在物理空间上，必须是完全相互独立的，各 区域无论是在空闲还是在使用中，应始终处于 完全的分隔状态; (2)不能有空气的直接相通。

理想的PCR实验室设计A

理想的PCR实验室设计B

平面设计图示

三、PCR实验室建设

临床基因扩增检验实验室需要依据《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》、《实验室生物安全通用要求》、《生物安全实验室建筑技术规范》等相关规定进行规划建设。

1、二级生物安全实验室的装修

根据《人间传染的病原微生物名录》， PCR实验室所操作致病性生物因子大多属于第二类病原微生物，实验活动所需生物安全实验室级别的生物危害等级为BSL-2。列举装修要点如下：

1、实验室墙壁、顶板和地板应当光滑、易清洁、防渗漏并耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑，不得在实验室内铺设地毯和悬挂窗帘。实验室的墙体，包括顶棚，应结构牢固、气密性好、所有阴角采用圆弧形线条过渡；墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒；墙体和吊顶建议使用彩钢板。

2、地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。

3、灯具要选用净化灯具，能达到便于清洗、不积尘的特点。实验室应设应急照明装置，同时考虑合适的安装位置，以保证人员安全离开实验室。

4、有可靠的电力供应和应急照明。每个房间必须装有紫外线杀菌灯，杀菌灯的安装高度在1.8～2.1m之间。

5、传递窗内部安装有紫外灯，供消毒用。

6、应配备足够的固定电源插座，避免多台设备使用共同的电源插座。应有可靠的接地系统，应在关键节点安装漏电保护装置或监测报警装置。

7、实验室台(桌)柜和座椅等应稳固和坚固，边角应圆滑。实验台面应防水，并能耐受热、有机溶剂、酸碱、消毒剂及其他化学剂。一般采用环氧树脂台面。

8、实验台中的橱柜和实验台应牢固，实验台、柜和其他设备之间应保持一定距离，以便清洁。

9、实验室门为净化门，应有可视窗并带自动闭门器，实验室的门与门不能相对开启，必须错位开启。并达到适当的防火等级，门锁及门的开启方向应不妨碍室内人员逃生。

10、实验室应设洗手池，水龙头开关宜为非手动式，宜设置在靠近出口处。

11、给水管道应设置倒流防止器或其他有效的防止回流的装置；给排水系统应不渗漏，下水应有防回流设计。

12、应配备适用的应急器材，如消防器材、意外事故处理器材、急救器材等。

13、应配备适用的通讯设备。

实验室的建设有布局、工程材料、通风系统、排风系统、压力梯度、建筑工艺等几个关键点，总结如下：

墙面：主体结构建议使用彩钢板围护，墙面光洁、不产尘积尘、耐腐蚀，易清洁、无缝隙；

地面：建议使用PVC卷材，、耐腐蚀、无缝隙、无渗漏；

阴阳角：均采用圆弧角密封处理，不易积尘；

传递窗：必须设置互锁(机械或电子)；

主入口：实验室主入口设有门禁管理；

通风系统：避免交叉污染；

排风系统：宜设置高效过滤器净化；

气流组织：采用上送下排形式；

压力梯度：压力梯度控制通过微压差计及精密自控系统控制；

排水系统：排水系统应不渗漏，下水应有防回流设计。

应急用电：应有紧急发电设备或双回路供电。关键设备应配备足够的UPS并接入设备。

防护设施：设置洗眼装置，必要时应有应急喷淋装置；设置非接触式操作理念(感应式水龙头、感应式自动门、互锁传递窗等)。

2、工程材料列表（列举部分）

3、PCR实验室的设备表（根据具体项目调整）

试剂储存和准备区  (PCR 1区)

功能：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的准备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。

标本制备区（PCR 2区）

功能：核酸（RNA、DNA）提取、贮存及其加入至扩增反应管。对于涉及临床样本的操作，应符合生物安全二级实验室防护设备、个人防护和操作规范的要求。

扩增区（PCR 3区）

功能：DNA扩增及检测。

产物分析区 （PCR 4区）

功能：扩增片段的进一步分析测定，如杂交、酶切电泳、变性高效液相分析、测序等。(开展项目不同对应不同仪器)

4、PCR实验室合并情况

PCR不同区域可合并情况（一）

场景：使用实时荧光PCR仪

依据：卫生部办公厅关于印发《医疗机构临床基因扩增管理办法》的通知；医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则；卫办医政发〔2010〕194号

合并：扩增区、扩增产物分析区可合并

PCR不同区域可合并情况（二）

场景：采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪

依据：卫生部办公厅关于印发《医疗机构临床基因扩增管理办法》的通知；医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则；卫办医政发〔2010〕194号

合并：标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。

四、PCR项目服务与工作开展

1）确认意向，签订合同：客户需求了解，项目效益评估，装修现场条件评估。

2）建设规划，布局设计：指导分区布局设计和平面布置，装修现场专业评估。

3）筹建及施工：施工和设施安装指导。

4）实验室仪器设备配置：根据项目需求提供设备清单，协助/完成采购。

5）实验室布置：分区标识指导，物品布置指导。

6）人才技能培训：专业技术培训（可与实验室布置同步进行）

7）实验室验收：指导质量体系搭建、指导验收前准备、协助验收申办、验收过程陪同等。

仪器、试剂要求

仪器：必须三证齐全

试剂：必须NMPA批准

项目：新开展检测项目应有相应临床科室出具的评估报告；在技术审核前应进行方法学验证

实验人员要求

必须持有PCR上岗合格证，PCR 实验室操作人员至少2名；

通过参加省临床检验中心组织的临床基因扩增实验室技术人员上岗培训班获得上岗证，培训班内容包括理论培训和实验培训。

需要具备资格、培训、技能与业绩档案

需要有培训记录及实施记录：每人需有年度培训内容（包括外出学习、进修、内部质量手册学习、业务学习及新项目开展学习等）。